Autres tests (confiés à des laboratoires extérieurs)

Tests in vivo

Test de toxicité aiguë sur Daphnia magna

Mécanisme d’action

• Toxicité non spécifique (inhibition de la mobilité)

Intérêt

• Organisme faisant partie du zooplancton des eaux stagnantes se nourrissant d’algues et servant de base à l’alimentation des poissons
• Organisme expérimental standard pour l’évaluation de l’écotoxicité aiguë des substances chimiques et des échantillons d’eau
  
  

Test de reprotoxicité chronique sur Ceriodaphnia dubia

Mécanisme d’action

• Reprotoxicité (croissance des populations)
• Toxicité non spécifique (mortalité)

Intérêt

• Organisme faisant partie du zooplancton des eaux stagnantes, se nourrissant d’algues et servant de base à l’alimentation des poissons
• Organisme expérimental standard pour l’évaluation de l’écotoxicité chronique des substances chimiques et des échantillons d’eau
  
  

Test de reproduction avec Potamopyrgus antipodarum (gastéropode)

Mécanisme d’action

• Reprotoxicité (nombre d’embryons)
• L’organisme utilisé pour l’expérimentation est le gastéropode aquatique Potamopyrgus antipodarum. En Europe, ce petit escargot vivipare d’origine néo-zélandaise se multiplie par reproduction asexuée, ce qui permet une détermination de l’efficacité de reproduction des animaux à la fois aisée et fiable.

Intérêt

• L’efficacité de reproduction est contrôlée par les hormones sexuelles et se trouve donc influencée par les substances interférant avec le système endocrinien.
• Les substances globalement toxiques présentant une activité de type androgénique et anti-œstrogénique induisent une baisse du nombre d’embryons produits.
• Les substances à activité de type œstrogénique induisent une augmentation spécifique du taux d’embryons.
  
  

Tests in vitro

ER-Calux

Mécanisme d’action

• Action œstrogénique
• Le test fait appel à une lignée de cellules humaines présentant des récepteurs des œstrogènes modifiés à l’aide d’un gène rapporteur luminescent. L’intensité de l’émission de lumière est proportionnelle à la quantité de substance liée au récepteur.

Intérêt

• Convient à la mise en évidence de nombreux toxiques contenus dans les produits du quotidien comme la pilule contraceptive (17α-éthinylestradiol), les plastiques (bisphénol A, phtalates), les pesticides (méthoxychlore) et les surfactants non ioniques (alkylphénols)
• Généralement plus sensible que le test YES
  
  

D’autres variantes du test Calux (AR-Calux, DR-Calux, GR-Calux etc.) partent du même principe et utilisent des lignées cellulaires dans lesquelles d’autres types de récepteurs ont été modifiés : par exemple, le DR-Calux travaille avec le récepteur Ah pour la détection des dioxines ou composés « dioxine-like ».

Essai de stéroïdogenèse sur lignée cellulaire H295R

Mécanisme d’action

• Test in vitro permettant de détecter des modifications dans la synthèse des hormones stéroïdiennes. Il fait appel à une lignée de cellules humaines exprimant la totalité des enzymes impliquées dans la stéroïdogenèse. Les cellules H295R sont d’autre part en mesure de synthétiser l’ensemble des hormones stéroïdiennes du système corticosurrénal fœtal et adulte. La concentration d’hormones est déterminée à l’aide de kits du commerce (ELISA par ex.).

Intérêt

• Permet de savoir si les substances ou échantillons naturels considérés sont susceptibles d’influencer la synthèse des hormones stéroïdiennes dans l’organisme exposé.
• „Outil“ d’étude des interactions entre substances chimiques et processus moléculaires et biochimiques de la voie de biosynthèse des stéroïdes.
  
  

Batterie de tests de cytotoxicité PAN 1 sur cellules de mammifères (fibroblastes de souris)

Effets mesurés: Divers paramètres de la vitalité des cellules

• Intégrité membranaire (lactate déshydrogénase extracellulaire, LDHe)

• Respiration cellulaire (sel de tétrazolium, XTT)

• Teneur en protéines (coloration à la sulforhodamine, SRB)

• Intégrité lysosomale (rouge neutre, NR)

Intérêt

• Permet la mise en évidence de substances susceptibles de perturber d’importantes fonctions cellulaires, ce qui peut avoir des répercussions au niveau de l’organisme entier.
  
  

Test de Ames

Mécanisme d’action

• Potentiel mutagène
  Des souches bactériennes mutantes de Salmonella typhimurium recouvrent sous l’effet d’une nouvelle mutation leur capacité à synthétiser elles-mêmes l’acide aminé histidine et donc à se développer sur le milieu de culture.

Intérêt

• Test simple, rapide et peu onéreux permettant de détecter un potentiel mutagène éventuel chez les substances ou mélanges de substances testés.